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实验一 壶菌纲、卵菌纲代表菌形态特征观察1

一、实验目的1

二、实验原理1

三、实验材料1

四、实验内容及步骤2

五、实验报告（作业）11

六、思考题11

七、参考文献11

附：半永久装片的制作方法11

实验二 接合菌门真菌的鉴定12

一、实验目的12

二、实验原理12

三、实验材料12

四、实验内容及步骤12

五、实验报告（作业）17

六、思考题17

七、参考文献18

附：培养水玉霉图示18

实验三 子囊菌门代表菌形态特征观察19

一、实验目的19

二、实验原理19

三、实验材料19

四、实验内容及步骤20

五、实验报告（作业）28

六、思考题28

七、参考文献28

附：真菌的石蜡制片技术流程29

实验四 担子菌门代表菌的形态特征观察31

一、实验目的31

二、实验原理31

三、实验材料31

四、实验内容及步骤31

五、实验报告（作业）38

六、思考题38

七、参考文献39

附：冷冻切片实验流程及注意事项39

实验五 半知菌类代表菌形态特征观察42

一、实验目的42

二、实验原理42

三、实验材料42

四、实验内容及步骤43

五、实验报告（作业）48

六、思考题48

七、参考文献49

附：扫描电子显微镜样品制作及观察丝状真菌49

实验六 黏菌基本形态特征的观察51

一、实验目的51

二、实验原理51

三、实验材料51

四、实验步骤52

五、实验报告（作业）53

六、思考题54

七、参考文献54

附：几种黏菌属种描述，请在体视显微镜下观察所提供的标本54

黏菌子实体图例55

实验七 丝状真菌细胞核的DAPI染色及观察57

一、实验目的57

二、实验原理57

三、实验材料57

四、实验步骤58

五、实验报告（作业）58

六、思考题59

七、参考文献59

附：荧光显微镜简介及使用步骤59

实验八 酿酒酵母原生质体制备与再生62

一、实验目的62

二、实验原理62

三、实验材料62

四、实验步骤63

五、实验报告（作业）64

六、思考题64

附：几种细菌过滤器及其使用65

实验九 稻巨座壳菌自噬体的显微观察66

一、实验目的66

二、实验原理66

三、实验材料68

四、实验步骤70

五、实验报告（作业）71

六、思考题71

七、参考文献71

实验十 氧化胁迫诱导白假丝酵母细胞凋亡的荧光检测72

一、实验目的72

二、实验原理72

三、实验材料74

四、实验步骤75

五、实验报告（作业）76

六、思考题76

七、参考文献76

实验十一 丝状真菌疏水蛋白的分离提取和检测77

一、实验目的77

二、实验原理77

三、实验材料80

四、实验步骤80

五、实验报告（作业）83

六、思考题83

七、参考文献83

实验十二 丝状真菌DNA快速提取及其18S rDNA序列测定84

一、实验目的84

二、实验原理84

三、实验材料85

四、实验步骤86

五、实验报告（作业）88

六、思考题88

七、参考文献88

实验十三 丝状真菌总RNA及mRNA的提取与检测89

一、实验目的89

二、实验原理89

三、实验材料92

四、实验步骤94

五、实验报告（作业）96

六、思考题96

七、参考文献96

实验十四 细菌源耐热木聚糖酶基因在黑曲霉中的表达98

一、实验目的98

二、实验原理98

三、实验材料101

四、实验步骤105

五、实验报告（作业）107

六、思考题107

七、参考文献107

实验十五 脂肪酶基因在毕赤酵母中的表达与目的蛋白检测108

一、实验目的108

二、实验原理108

三、实验材料110

四、实验步骤110

五、实验报告（作业）113

六、思考题113

七、参考文献113

实验十六 真核细胞表达异源蛋白的糖基化修饰及检测114

一、实验目的114

二、实验原理114

三、实验材料及试剂116

四、实验步骤116

五、实验报告（作业）118

六、思考题118

七、参考文献118

实验十七 多拷贝异源基因重组表达体系的构建及其qPCR检测119

一、实验目的119

二、实验原理119

三、实验材料120

四、实验步骤121

五、实验报告（作业）125

六、思考题125

七、参考文献126

附：实时荧光定量PCR仪图示及其基本技术原理详解126

实验十八 采用重叠PCR技术敲除粟酒裂殖酵母Clr4基因128

一、实验目的128

二、实验原理128

三、实验材料130

四、实验步骤132

五、实验报告（作业）135

六、思考题135

七、参考文献135

实验十九 利用细菌CRISPR/Cas系统敲除酿酒酵母目的基因136

一、实验目的136

二、实验原理136

三、实验材料138

四、实验步骤139

五、实验报告（作业）140

六、思考题141

七、参考文献141

实验二十 粗糙脉孢菌双基因缺失突变体的构建及双基因的遗传互作分析142

一、实验目的142

二、实验原理142

三、实验材料144

四、实验步骤147

五、实验报告（作业）148

六、思考题149

七、参考文献149

附录1常用培养基配方及染色液150

附录2安斯沃思（Ainsworth， 1973）的分类系统159

附录3真菌词典第八版（1995年）的分类体系160

附录4真菌词典第九版（2001年）的分类体系161

附录5真菌词典第十版（2008年）的分类体系163

附录6互动实验室设备使用原则及方法（学生端的使用）165

附录7真菌常用网站167

附录8常用真菌学名列表169

附录9真菌图例179

附录10黏菌子实体图例185

附录11实验七和实验十彩图186