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第一篇　动物细胞培养技术2

第一章 动物细胞培养概述2

第一节 动物细胞培养的基本概念及其优缺点2

一、动物细胞培养的概念2

二、动物细胞培养的优缺点2

第二节　动物细胞培养发展史4

一、动物细胞培养技术的创立4

二、动物细胞培养技术的发展5

第三节　动物细胞培养的应用7

一、在生物学领域的基础研究中的应用7

二、在临床医学上的应用7

三、在动物育种上的应用8

四、在生物制品生产上的应用8

第四节 动物细胞培养工作的基本要求和工作方法8

一、动物细胞培养工作的基本要求8

二、动物细胞培养工作方法9

【理论难点自测】10

实验实训项目 动物细胞培养的无菌操作10

第二章　动物细胞培养的基本知识13

第一节　培养细胞的细胞生物学13

一、培养细胞的生长类型和形态特征13

二、培养细胞分化状态的变化15

三、培养细胞的生长特点16

四、培养细胞的生长和增殖过程18

第二节　培养细胞的生长条件21

一、营养需要21

二、生存环境23

第三节　动物细胞培养实验室24

一、动物细胞培养实验室的设置24

二、动物细胞培养实验室的设备26

三、动物细胞培养实验室常用器具29

【理论难点自测】33

实验实训项目 动物细胞培养常用设备的使用33

第三章 动物细胞培养的准备工作36

第一节　培养用品的清洗、包装和灭菌37

一、培养用品的清洗37

二、培养用品的包装40

三、培养用品的消毒灭菌41

第二节 动物细胞培养用液的类型、配制和无菌处理44

一、平衡盐溶液44

二、消化液44

三、天然培养基45

四、合成培养基48

五、完全培养基49

六、无血清培养基50

七、其他常用液50

【理论难点自测】51

实验实训项目一 动物细胞培养实验器具的清洗、包装和灭菌52

实验实训项目二 几种动物细胞培养用液的配制和无菌处理55

第四章 动物细胞培养的基本技术和方法59

第一节　培养细胞的取材与分离59

一、培养细胞的取材59

二、组织材料的分离61

第二节　动物细胞的原代培养技术62

一、组织块培养法63

二、消化培养法64

第三节　培养细胞的观察和检测技术64

一、培养细胞的常规观察64

二、细胞生长曲线的测定66

三、细胞培养的污染检测及其排除67

第四节　动物细胞传代培养技术70

一、原代培养的首次传代70

二、细胞传代方法71

三、细胞系的维持72

第五节　细胞的冻存、复苏和运输技术72

一、细胞的冻存72

二、细胞的复苏73

三、细胞的运输74

【理论难点自测】74

实验实训项目一　细胞计数及密度换算75

实验实训项目二　小鼠胎儿细胞的原代培养（组织块培养法）77

实验实训项目三 鸡胚原代细胞的培养（消化培养法）79

实验实训项目四　培养细胞的观察82

实验实训项目五　细胞活性检查84

实验实训项目六　原代培养细胞的传代86

实验实训项目七　细胞冻存技术88

实验实训项目八　细胞的常规复苏技术90

第五章 动物细胞的大规模培养93

第一节 动物细胞大规模培养概述93

一、动物细胞大规模培养技术的概念93

二、动物细胞大规模培养技术的应用93

三、动物细胞大规模培养的一般工艺流程94

第二节　动物细胞大规模培养的方法和操作方式95

一、动物细胞大规模培养的方法95

二、大规模培养技术的操作方式101

第三节　动物细胞生物反应器103

一、搅拌罐式生物反应器104

二、气升式生物反应器105

三、中空纤维生物反应器107

四、其他生物反应器108

【理论难点自测】108

实验实训项目一 Vero细胞的微载体培养109

实验实训项目二 动物细胞生物反应器的使用或参观110

第六章 特殊细胞培养概要111

第一节　正常组织细胞的培养111

一、上皮细胞培养111

二、神经细胞培养113

第二节　肿瘤细胞培养114

一、体外培养肿瘤细胞的生物学特性114

二、肿瘤细胞的培养要点115

【理论难点自测】117

实验实训项目一 异体动物接种成瘤实验118

实验实训项目二 肿瘤细胞的软琼脂集落实验119

第七章 与动物细胞培养相关的部分实验技术122

第一节　单克隆抗体的制备122

一、单克隆抗体的概念122

二、杂交瘤技术制备单克隆抗体的基本原理123

三、杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要过程123

四、制备单克隆抗体可能出现的主要问题128

第二节　细胞的基因转染技术129

一、待转染细胞的准备129

二、常用的细胞转染方法129

【理论难点自测】131

实验实训项目一　细胞融合132

实验实训项目二　细胞克隆135

第二篇　植物细胞培养技术140

第八章 植物细胞培养概论140

第一节　植物组织与细胞培养140

一、植物组织培养140

二、植物细胞培养142

第二节　植物细胞培养的发展史143

一、植物细胞培养的创立阶段143

二、植物细胞培养的发展阶段144

三、植物细胞培养的应用研究阶段144

第三节　植物细胞培养的应用145

一、在植物育种方面的应用146

二、在植物脱毒方面的应用147

三、在离体快繁方面的应用147

四、在植物种质资源保存方面的应用147

【理论难点自测】147

实验实训项目 植物细胞培养无菌操作训练148

第九章 植物细胞培养的条件150

第一节 植物细胞培养的实验室条件150

一、植物细胞培养实验室的设计150

二、植物细胞培养实验室的仪器和设备151

三、植物细胞培养的培养器具153

第二节　植物细胞培养的培养基155

一、培养基的组成156

二、常用的植物细胞培养基种类158

三、植物细胞培养的培养基配制159

第三节 植物细胞培养的环境条件162

一、温度162

二、湿度163

三、光照163

四、气体164

五、pH164

【理论难点自测】165

实验实训项目一　植物组织细胞培养基母液的配制和保存166

实验实训项目二 植物组织细胞培养基的配制和灭菌167

实验实训项目三　植物细胞培养常用设备的使用169

第十章 植物细胞培养的基本过程和方法171

第一节　植物细胞的获取171

一、从外植体直接分离植物细胞171

二、通过愈伤组织诱导获取植物细胞173

第二节　植物细胞的悬浮培养175

一、悬浮细胞的诱导175

二、悬浮培养细胞的生长和测定176

三、悬浮培养细胞的同步化176

第三节　植物细胞的固定化培养177

一、植物细胞固定化的方法177

二、固定化植物细胞的培养方法179

第四节　单细胞培养179

一、植物单细胞的制备179

二、植物单细胞的培养179

三、影响植物单细胞培养的因素181

第五节　原生质体培养182

一、植物原生质体的特点182

二、植物原生质体的制备183

三、植物原生质体的培养方法186

【理论难点自测】187

实验实训项目一　胡萝卜和白菜成熟胚愈伤组织培养187

实验实训项目二　植物细胞悬浮培养189

第十一章 植物细胞的大规模培养191

第一节　植物细胞大规模培养概述191

一、植物细胞大规模培养技术的概念191

二、植物细胞大规模培养的应用和工业前景191

三、植物细胞大规模培养流程194

第二节 植物细胞大规模培养技术194

一、植物细胞规模化培养体系的建立194

二、植物细胞的大规模培养方法195

第三节　植物细胞生物反应器197

一、搅拌式生物反应器198

二、非搅拌式生物反应器199

三、植物细胞固定化培养生物反应器200

【理论难点自测】201

实验实训项目 种子细胞筛选与细胞规模化培养201

附录　细胞培养技术常用术语中英文对照203

参考文献208